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【学术论文】检测阿卡斑病毒N蛋白抗体的双抗原夹心ELISA方法的建立及应用

发布时间:2025-09-30 09:14:47 浏览量:103

陈赫威1,2陆晨阳1杨清1,2曹佳媛3覃绍敏1陈凤莲1吴健敏1陈樱2马玲1

1.广西壮族自治区兽医研究所广西兽医生物技术重点实验室/农业农村部中国(广西)-东盟跨境动物疫病防控重点实验室2.广西大学动物科学技术学院3.南宁动物园

发表刊物:中国兽医学报 . 2025 ,45 (08) 

摘要:利用原核表达系统从上清中获得浓度高、纯度好的重组阿卡斑病毒(Akabane virus, AKAV)N蛋白;通过免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,运用间接ELISA和Western blot测定多克隆抗体效价。结果显示,多克隆抗体效价为1∶8.192×10~7,并具有较好的反应性;通过优化反应条件,建立了检测AKAV抗体的双抗原夹心ELISA,该方法可检测牛、羊等多种动物血清中AKAV抗体;与蓝舌病毒(blue tongue virus, BTV)、鹿流行性出血热病毒(epizootic hemorrhagic disease virus of deer, EHDV)、牛肠道病毒(bovine enterovirus, BEV)和猪伪狂犬病病毒(porcine pseudorabies virus, PRV)阳性血清均无交叉反应;批内、批间重复性试验变异系数均小于10%;与AKAV阻断ELISA试剂盒相比,敏感性高8~16倍,符合率为93.33%,结果一致性κ系数为0.864。结果表明,建立的双抗原夹心ELISA方法灵敏、特异、可重复性高,为AKAV抗体检测及防控提供了技术支持。

关键词:

阿卡斑病毒;阿卡斑病;N蛋白;多克隆抗体;双抗原夹心ELISA;

基金资助:

国家自然科学基金资助项目(32160830); 广西兽医生物技术重点实验室开放基金资助项目(20-065-23-B-2); 广西壮族自治区兽医研究所基本科研业务费专项资助项目(桂科专项24-4);

  • DOI:

    10.16303/j.cnki.1005-4545.2025.08.04

  • 专辑:

    农业科技

  • 专题:

    畜牧与动物医学

  • 分类号:

    S855.3

  • 在线公开时间:

    2025-09-28 10:44