1.技术原理：针对当前防控PDCoV临床感染及流行病学调查研究的实际需要，建立一种快速、灵敏、特异的检测PDCoV N蛋白抗体的间接ELISA技术并组装成试剂盒，并对广西猪群PED血清临床样本进行初步血清学检测分析，掌握疫情动态及时预警，为评估猪场PDCoV感染的状况及指导搞好PDCoV综合防控工作提供可靠的技术和产品，结合我区生猪产业转型升级推进建设，提高生猪重要疫病防控科学性、针对性及实效性，以有效防控我区生猪重要疫病发生及流行，以促进我区养猪业的健康可持续发展。

  2.性能指标：猪丁型冠状病毒(porcine deltacoronavirus, PDCoV)是单链正股RNA病毒，在遗传分类上属于套式病毒目冠状病毒科冠状病毒属｡PDCoV全长25.4 kb，其基因组结构与一般冠状病毒(Coronavirus, CoV)相似，基因组结构从5’-3’末端依次为复制酶开放阅读框lab(replicase ORFlab), S糖蛋白基因(spike, S)、小膜蛋白基因(envelope, E)、膜蛋白基因(membrane, M)以及核衣壳蛋白基因(nucleocapsid, N)，5’端和3’端都有较短的非翻译区。PDCoV基因组共编码4种主要结构蛋白，即N、E､M和S蛋白。其中，N蛋白是病毒组成成分中最为丰富和多功能的蛋白。N蛋白是与基因组RNA形成复合物的结构蛋白，在病毒体装配期间与病毒膜蛋白相互作用，并且在提高病毒转录和装配效率中，及在致病机理形成过程中起关键作用。

  由于目前缺乏相关血清学检测商品化试剂，故目前主要使用常规 PCR、荧光定量 PCR方法和套式PCR等技术手段来检测PDCoV抗原。因此本发明建立了一种简单且灵敏的PDCoV抗体检测方法。具体如下：对广西地方毒株PDCoV的核衣壳N基因进行RT-PCR扩增、克隆到pMD18-T载体，并将N基因插入到原核表达载体pET-32(a)构建PDCoV N蛋白的重组表达质粒pET-32(a)-N，摸索及优化重组N蛋白最佳表达条件，大量表达及纯化表达目的蛋白；以重组N蛋白包被ELISA板，确定最佳抗原包被浓度及包被时间、血清稀释倍数、二抗工作倍数、阴阳性血清样品的临界值等参数，建立PDCoV抗体的间接ELISA检测方法，研制出一种PDCoV抗体ELISA检测试剂盒。将研制出的ELISA检测试剂盒试验应用于兽医临床猪血清样品的PDCoV抗体的检测，为进一步有效防制新发的猪丁型冠状病毒病提供一种技术支撑手段。