专利号：（ZL202310550697.9）

专利简介：流感病毒(Influenza virus,IV)属于正黏病毒科 (Orthomyxoviridae)，该科含有四个属，分别是甲型流感病毒(Influenza A virus, IAV)、乙型流感病毒(Influenza B virus, IBV)、丙型流感病毒(Influenza C virus, ICV)和丁型流感病毒(Influenza D virus, IDV)。禽流感病毒(Avian influenza virus, AIV)属于甲型流感病毒。AIV是单股负链RNA病毒，基因组由8个不连续的基因片段构成，分别是血凝素 (HA)、核蛋白(NP)、神经氨酸酶(NA)、聚合酶B2(PB2)、聚合酶B1(PB1)、聚合酶A(PA)、基质蛋 白(M)和非结构蛋白(NS)；M2蛋白的外结构域(M2e)在甲型流感病毒中非常保守，被认为是开发广谱甲型流感疫苗的候选靶基因。研究表明多拷贝M2e偶联其他蛋白(如NP蛋白、NA蛋白和HA蛋白等)或与运载工具(乙型肝炎核心颗粒、人乳头瘤病毒L蛋白、细胞外膜复合物和鞭毛蛋白等)联合表达的蛋白免疫试验动物能够提高M2e蛋白的免疫原性，免疫所产生的抗体能够保护免疫动物免受不同亚型甲型流感病毒得攻击。研究显示，人、禽和猪流感病毒的M2e蛋白上的第10-20氨基酸有差异，分别是：PIRNEWGCRCN(人)、PTRNGWECKCS(禽)和PIRNGWECRCN(猪)，并且特异性识别人流感病毒M2e蛋白的单克隆抗体只能微弱的识别来源 于禽流感毒株的M2e蛋白。H9N2亚型AIV是目前家禽中分布最广泛的低致病性AIV，研究也显 示我国H9N2亚型AIV在活禽市场中分离率较高。因此，开展研究H9N2亚型AIV相关研究对其 检测、预防及治疗十分必要

本发明公开了一种H9N2亚型AIV多拷贝M2e蛋白单克隆抗体。据此，还建立了相关细胞系及其制备方法。本发明杂交瘤细胞株4E10-A10的保藏编号CCTCCNO:C202328，试验表明，其分泌的抗多拷贝M2e蛋白 单克隆抗体具有高特异性、敏感性，可以特异性识别2M2e、3M2e和4M2e重组蛋白及表达H9N2亚型 禽流感病毒3M2e蛋白的细胞，适用于间接免疫荧 光检测和Western-blot鉴定。综上，本发明为AIV M2e单克隆抗体对AIV的作用机制研究和开展以AIV M2e蛋白为靶点的广谱疫苗应用效果评价提供了物质材料和技术支持