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猪丁型冠状病毒、猪A群轮状病毒多重TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立

发布时间:2025-12-18 12:25:53 浏览量:35

赵硕1,2许心婷2陈婷婷2全琛宇2许艺兰2杨讯业2何春妮3林昌华1,4程珂1,4吴先华1,5冯明5段群棚1,2秦毅斌1,2何颖2

1.广西大学动物科学技术学院  2.广西壮族自治区兽医研究所/广西兽医生物技术重点实验室/农业农村部中国(广西)-东盟跨境动物疫病防控重点实验室  3.南宁市武鸣区动物疫病预防控制中心  4.广西农垦永新畜牧集团有限公司  5.广西农垦永新畜牧集团新兴有限公司


发表刊物;畜牧与兽医. 2025 ,57 (12)

摘要:旨在建立一种猪丁型冠状病毒(PDCoV)、猪A群轮状病毒(PoRV)的快速鉴别诊断方法,根据PDCoV的N基因、PoRV的VP6基因分别设计了检测引物及TaqMan探针,并设立猪源β-actin内参基因,经反应条件优化,对特异性、敏感性、重复性进行验证并初步应用于临床样品检测,最终成功建立了一个可通过β-actin进行质控、同时鉴别诊断PDCoV、PoRV多重TaqMan荧光定量PCR检测方法。结果:该方法可特异性扩增PDCoV、PoRV及猪源β-actin目标基因,与猪圆环病毒2型(PCV2)、猪圆环病毒3型(PCV3)、猪瘟病毒(CSFV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、伪狂犬病病毒(PRV)、猪星状病毒(PAstV)的核酸无交叉反应,对PDCoV、PoRV及β-actin的最低检出限分别为1.64×10~2、1.65×10~2和5.99×10~3 copies/μL,重复性试验中组内及组间变异系数均低于2%,说明该方法具有特异、灵敏、稳定的特点。应用该方法对63份广西猪腹泻临床样品进行检测,结果与PDCoV、PoRV的商品化荧光定量PCR检测试剂盒的结果相一致。综上,本研究建立了......

关键词:猪丁型冠状病毒;猪A群轮状病毒;多重TaqMan荧光定量PCR;

基金资助:国家现代农业产业技术体系广西创新团队建设专项(nycytxgxcxtd-2023-15-02); 南宁市科技重大专项(20232039); 广西基本科研业务费专项(22-4,23-3,24-3,24-7,24-11); 广西农业科技自筹经费项目(Z202225,Z202222,Z2023034); 广西兽医生物技术重点实验室开放基金项目(22-035-32-B-02,23-035-32-B-02,23-035-32-B-01);

专辑:农业科技;基础科学

专题:生物学;畜牧与动物医学

分类号:S852.651

在线公开时间:2025-12-10 13:12(知网平台在线公开时间,不代表文献的发表时间)