刘思雨1，2，赵 硕1，2，欧阳康2，何 颖1，卢冰霞1，赵 武1，段群棚1，许心婷1， 全琛宇1，许艺兰1，李 斌1，程 珂2，3*，秦毅斌1，2*
1. 广西壮族自治区兽医研究所 广西兽医生物技术重点实验室 农业农村部中国（广西）－东盟跨境动物 疫病防控重点实验室，广西 南宁530001；
2. 广西大学 动物科学技术学院 广西高校动物疫病预防与 控制重点实验室 广西壮族自治区兽用生物制品工程研究中心，广西 南宁530005；
3. 广西农垦永新畜牧集团有限公司，广西 南宁530016
中国兽医科学,2025,55(01):1-10.DOI:10.16656/j.issn.1673-4696.2025.0004.
摘要：为探究猪丁型冠状病毒（PDCoV）非结构蛋白 NSP9 和 NSP16 对宿主细胞Ⅰ型干扰素（IFN－Ⅰ） 的调控作用，在 293T 细胞中过表达 NSP9、NSP16，通过双荧光素酶报告系统和 qRT-PCR 评估 NSP9、NSP16 对仙台病毒（SeV）诱导产生的 IFN-β的影响，再通过 qRT-PCR、Western-blot 检测 NSP9、NSP16 对 RIG-Ⅰ样 受体（RLRs）信号通路的影响。结果显示，NSP9、NSP16 能显著抑制和降低 SeV 诱导的 IFN-β启动子活性、IFN-β 与干扰素刺激基因 15（ISG15）的转录水平。 同时，过表达 NSP9 可以显著降低 RLRs 信号通路中视黄酸诱导 基因Ⅰ（RIG-Ⅰ）、黑色素瘤分化相关基因 5（MDA5）、TANK 结合激酶 1（TBK1）和干扰素调节因子 3（IRF3） 的转录水平，并显著抑制 RIG-Ⅰ、MDA5、线粒体抗病毒信号蛋白（MAVS）和 TBK1 的表达；而过表达 NSP16 可以显著降低 RIG-Ⅰ和 MDA5 的转录水平，并显著抑制 RIG-Ⅰ的表达和 IRF3 的磷酸化。 结果表明，PDCoV 的非结构蛋白 NSP9 和 NSP16 可能通过调控 RLRs 信号通路来抑制 IFN-Ⅰ产生，为阐明PDCoV 的致病机 制、寻找新的治疗靶点、开发新型抗病毒药物奠定了理论基础。
关键词：猪丁型冠状病毒；NSP9 蛋白；NSP16 蛋白；Ⅰ型干扰素