鸡星状病毒(Chicken astrovirus,CAstV)和禽肾炎病毒(Avian nephritis virus,ANV)是两种常见的鸡源星状病毒(Astrovirus,AstV)。鸡星状病毒感染可引起腹泻、组织器官感染,伴有肝脏坏死和苍白,以及肾脏、胰腺和肾脏的肿胀。禽肾炎病毒感染雏鸡主要症状为腹泻、生长迟缓、肾损伤、间质性肺炎、肾小管肾病和家禽痛风等,导致死亡率增加。在临床上鸡星状病毒和禽肾炎病毒常发生混合感染,主要感染雏鸡,且两种病毒都可以通过鸡胚垂直传播,蛋鸡感染会造成产蛋量下降,肉鸡感染后可造成发育障碍等症状,对家禽养殖业造成经济损失。到目前为止,还没有治疗鸡星状病毒和禽肾炎病毒的有效药物和疫苗,只能依靠定期消毒和鸡群净化等措施减轻影响,因此一种快速、高效的检测方法对于病毒的预防具有重要的指导意义。
本发明设计利用环介导等温扩增技术,设计鸡星状病毒和禽肾炎病毒的特异性LAMP引物,建立一种快速、灵敏、准确检测鸡星状病毒和禽肾炎病毒的二重荧光RT-LAMP检测方法。目前针对鸡星状病毒和禽肾炎病毒的检测技术主要为病毒分离、PCR、荧光定量PCR、间接ELISA等。以上检测方法都有不同程度的缺点:病毒分离准确可靠、但是耗时长、缺少理想的细胞系;PCR操作简便但耗时长,产物易残留造成假阳性;荧光定量PCR灵敏度高,但仪器要求精密,基层应用受限;ELISA方法容易操作,但是检测过程中容易出现假阳性并且每次只能检测一种病毒。本发明将新型核酸等温扩增技术引入禽病检测中,该方法具有操作简单、恒温反应、耗时短等优点,可实现高效便捷的诊断。该技术为病毒临床诊断、疾病防控、鸡场早期的病毒净化和防控工作提供技术指导。